Matrix metalloproteinases 2 and 9 expression in canine normal prostate and with proliferative disorders / Expressão de metaloproteinases de matriz 2 e 9 na próstata canina normal e com lesões proliferativas

In this study the expression of metalloproteinases 2 (MMP-2) and 9 (MMP-9) in canine normal prostates and with proliferative disorders was evaluated to verify the role of these enzymes in extracellular matrix remodeling (ECM) and in the tissue invasion process. A total of 355 prostatic samples were obtained, from which 36 (10.1%) were normal prostates, 46 (13.0%) with benign prostatic hyperplasia (BPH), 128 (36.1%) with proliferative inflammatory atrophy (PIA), 74 (20.8%) with prostatic intraepithelial neoplasia (PIN), and 71 (20.0%) with prostatic carcinoma (PC). Difference in cytoplasmic immunohistochemical staining of MMP-2 and MMP-9 between acinar epithelium and periacinar stroma was found regarding the different diagnosis. The correlation between MMP-2 and MMP-9 expression in relation to the number of labeled cells in acinar epithelium and periacinar stroma, as well as to the staining intensity in the periacinar stromal cells was evidenced in canine prostates with PIA. In conclusion, MMP-2 and MMP-9 expression has a variation in canine prostate according to the lesion, with lower expression in normal tissue and with BPH, and higher expression in those with PIA, PIN and PC. Moreover, the inflammatory microenvironment of the PIA has influence in the activity of both enzymes.

Este estudo teve como objetivo avaliar a expressão das metaloproteinases 2 (MMP-2) e 9 (MMP-9) em próstatas caninas normais e com desordens proliferativas, verificando o papel dessas enzimas na remodelação da matriz extracelular (MEC) e no processo de invasão tecidual. Um total de 355 amostras prostáticas foram obtidas, sendo 36 (10,1%) normais, 46 (13,0%) com hiperplasia prostática benigna (HPB), 128 (36,1%) com atrofia inflamatória proliferativa (PIA), 74 (20,8%) com neoplasia intraepitelial prostática (PIN) e 71 (20,0%) com carcinoma prostático (CP). Houve diferença de imunomarcação citoplasmática para MMP-2 e MMP-9 entre o epitélio acinar e o estroma periacinar, quanto aos diferentes diagnósticos. Observou-se correlação entre a expressão de MMP-2 e MMP-9 em relação ao número de células marcadas no epitélio acinar e estroma periacinar, bem como para a intensidade de marcação das células estromais periacinares em próstatas caninas com PIA. Conclui-se que há variação na expressão de MMP-2 e MMP-9 em próstatas caninas de acordo com a lesão, com menor expressão em próstatas caninas normais e com HPB, e maior naquelas com PIA, PIN e CP. Ainda, o microambiente inflamatório na PIA influencia a atividade de ambas as enzimas.

Morphological patterns and malignancy criteria of transmissible venereal tumor in cytopathological and histopathological exams / Padrões morfológicos e critérios de malignidade do tumor venéreo transmissível aos exames citopatológico e histopatológico

The aim of this study was to identify morphological patterns and malignancy criteria of the TVT in cytopathological and histopathological evaluations and relate these characteristics to clinical evolution and response to chemotherapy. Regarding studied animals, sixteen dogs were female and four were male. The age of the animals ranged between one and ten years old. Considering breed, 80% of the dogs were mongrel dogs and 20% were of other breeds. It was found that the cytological samples allowed a better characterization of the cell type than histological ones. The plasmacytoid was the most common morphological type of TVT, followed by the lymphocytoid and mixed standards. There was no difference among the scores for the malignancy criteria and morphological types of TVT. Regarding response to chemotherapy, no morphological type of the TVT showed any difference, but the TVT presents morphological peculiarities that may interfere with tumor behavior, especially those related to increased aggressiveness and that are observed in the plasmacytoid TVT.

Este estudo teve por objetivo identificar os padrões morfológicos e os critérios de malignidade do TVT aos exames citológico e histopatológico e relacionar essas características à evolução clínica e à resposta à quimioterapia. Dos ani- mais estudados, dezesseis cães eram fêmeas e quatro machos. A idade dos animais variou entre um e dez anos de idade. Quanto à raça, 80% dos cães eram sem raça definida e 20% de outras raças. Constatou-se que as amostras citológicas permitiram melhor caracterização do tipo celular do que as histológicas. O TVT tipo plasmocitoide foi o de maior ocor- rência, seguido pelos padrões linfocitoide e misto. Não houve diferença entre os escores estabelecidos para os critérios de malignidade e os tipos do TVT. Nenhum tipo morfológico do TVT diferiu quanto à resposta quimioterápica, mas o TVT apresenta particularidades morfológicas que podem interferir no comportamento tumoral, especialmente aquelas relacionadas à maior agressividade, e que são observadas no TVT plasmocitoide.

Caracterização morfométrica do pênis e prepúcio de touros das raças Nelore e Gir / Morphometric characterization of the penis and prepuce of Nelore and Gir bulls

O objetivo deste trabalho foi caracterizar alguns aspectos morfométricos do pênis e prepúcio de touros das raças Nelore e Gir, estabelecendo as correlações destes parâmetros com outras medidas corporais. O protocolo experimental foi dividido em duas etapas, sendo que na primeira foram selecionados 40 touros, 20 da raça Nelore e 20 da raça Gir, com idade de 30 a 38 meses e peso entre 382 e 468 Kg. Após o abate dos animais em frigorífico, foram coletadas peças de pênis para dissecação e morfometria. Na segunda etapa, foram selecionados 43 touros, 23 da raça Nelore e 20 da raça Gir, com idade de 60 a 96 meses e peso entre 890 a 1120 Kg, provenientes de centrais de coleta de sêmen, para mensuração do peso e comprimento corporal, comprimento da garupa, perímetro torácico, altura anterior e posterior, menor perímetro do metacarpo esquerdo e do metatarso esquerdo, comprimento do prepúcio, menor distância do óstio prepucial à parede do abdome e perímetro do óstio prepucial. As medidas obtidas foram submetidas a teste de correlação linear. O comprimento médio do pênis e prepúcio de touros da raça Nelore foi de 71,96 cm e 52,4 cm, respectivamente e nos touros da raça Gir de 75,73 cm e 57 cm, respectivamente. Dentre as correlações efetuadas, destacam-se duas positivas; uma baixa entre o comprimento corporal e comprimento prepucial (r = 0,31, p < 0,05) e outra média entre a massa corporal e o comprimento prepucial (r = 0,66, p < 0,05). Os resultados deste estudo poderão contribuir para se estabelecer o padrão destas medidas nas raças Nelore e Gir, além de indicar as correlações com outras medidas corporais que podem ser empregadas para proceder a seleção genética de touros para a reprodução.

The aim of this study was to characterize some morphometric aspects of the penis and prepuce of Nelore and Gir bulls establishing the correlations between these parameters and other body measures. The experimental protocol was divided into two stages, being that in the first stage it was selected 40 animals, 20 Nelore and 20 Gir bulls, aged between 30 to 38 months and weighing between 382 and 486 kg. After the killing of the animals in the slaughterhouse, it was collected pieces of penis for penile dissection and morphometry. In the second stage, were selected 23 Nelore and 20 Gir bulls aged between 60 to 96 months and weighing between 890 and 1120 kg. The animals were obtained from semen collection centrals and were submitted to measurement of body mass and length, rump length, thoracic perimeter, anterior and posterior height, the lower perimeter of the left metacarpal and metatarsal, length of the prepuce, the shortest distance from preputial ostium to abdominal wall and the preputial ostium perimeter. The measures obtained were subjected to linear correlation test. The average length of the penis and prepuce of Nelore bulls were 71.96 cm and 52.4 cm respectively and in the Gir bulls were 75.73 cm and 57 cm respectively. Two positive correlations stand out among the analysis performed, the low correlation between body and preputial length (r = 0,31, p < 0,05) and mean correlation between body mass and preputial length (r = 0,66, p < 0,05). The results of this study could contribute to establish the pattern of these measures in the Nelore and Gir races and indicate the correlations with other body measures that can be considered to perform the genetic selection of bulls for breeding.

Angiogenic activity of Calendula officinalis flowers L. in rats / Atividade angiogênica das flores da Calendula officinalis L. em ratos

Purpose: In this work, angiogenic activity of Calendula officinalis L. (Asteraceae) ethanolic extract and dichloromethane and hexanic fractions were evaluated, considering medicinal properties, especially healing activity, are attributed to this plant. Methods: Models using 36 rats and 90 embryonated eggs were used to evaluate healing and angiogenic activities of extracts and fractions of the plant, through the induction of skin wounds and the chorioallantoic membrane, respectively. The effect of vascular proliferation was also tested from the study to verify the intensity of expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in cutaneous wounds in rats. Results: The angiogenic activity of the extract and the fractions was evidenced in both experimental models. It was verified that this effect is not directly related to the expression of VEGF and it could be associated to other pro-angiogenic factors. Conclusion: The healing activity referred to C. officinalis is related, among other factors, to its positive effect on angiogenesis, characterized by the induction of neovascularization.

Objetivo: Neste trabalho a atividade sobre a angiogênese do extrato etanólico (EEC) e das frações diclorometano e hexânica das flores de Calendula officinalis L. (Asteraceae) cultivada no Brasil foram avaliados, visto que propriedades medicinais têm sido atribuídas às flores da planta, destacando-se a atividade cicatrizante. Métodos: Modelos utilizando 36 ratos e 90 ovos embrionados foram usados para avaliar as atividades cicatrizante e angiogênica dos extratos e frações da planta, por meio da indução de feridas cutâneas e da membrana corioalantóide, respectivamente. O efeito proliferativo vascular foi também testado a partir do estudo imunoistoquímico, realizado para verificar a intensidade da expressão do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) na derme de ratos. Resultados: A atividade angiogênica do extrato e das frações foi evidenciada nos dois modelos experimentais empregados. Foi evidenciado que este efeito não estava diretamente relacionado à expressão do VEGF, podendo estar associado a outros fatores pró-angiogênicos. Conclusão: A atividade cicatrizante referida a C. officinalis está relacionada ao seu efeito positivo sobre a angiogênese, e este foi caracterizado pela indução de neovascularização.

Expressão de Cyr61 em glândulas mamárias normais e neoplásicas de cadelas / Cyr61 expression in normal and neoplastic mammary glands of bitches

As neoplasias mamárias são as mais frequentes em cadelas, representando 25 a 30 por cento do total das afecções neoplásicas das fêmeas caninas. Durante a carcinogênese ocorrem várias modificações na expressão de proteínas, como a Cyr61, envolvida na proliferação celular e na angiogênese. Assim, este estudo teve por objetivo determinar o perfil de expressão dessa proteína, por meio da técnica de imunoistoquímica, em glândulas mamárias normais e neoplásicas de cadelas. Para tal, foram selecionados 10 casos de cada um dos diagnósticos: adenoma simples, carcinoma complexo e carcinoma simples sólido, além de 10 fragmentos de glândulas mamárias normais, perfazendo o total de 40 fragmentos. O anticorpo policlonal anti-Cyr61 apresentou marcação em células epiteliais mamárias normais, evidenciando seu papel nos mecanismos de apoptose e proliferação celular. Houve ainda acentuada imunomarcação em tecidos mamários normais e com adenomas, e marcação discreta em carcinomas, diferente do padrão de expressão observado no tecido mamário de mulheres. A expressão constitutiva da proteína Cyr61 foi demonstrada no tecido mamário canino, constituindo uma alternativa de investigação neoplásica para as alterações mamárias de cadelas.

Mammary glands are the most usual sites of tumors in bitches, representing 25 to 30 percent of all types of cancer. During cancer genesis, several genetic changes alter the expression of different proteins like Cyr61, a peptide involved in cell proliferation and angiogenesis. This work aimed to determine through immunohistochemistry the expression profile of Cyr61 in normal and neoplastic mammary glands from bitches. So, 10 cases of each diagnose were selected: simple adenoma, complex carcinoma, simple solid carcinoma and fragments of normal mammary glands, in a total of 40 cases. Sections were subjected to immunohistochemistry, employing primary antibodies directed Cyr61. Cyr61 labeling of normal mammary epithelial cells is probably linked to its role in apoptosis and cellular proliferation. The labeling was more intense in normal and adenoma fragments and was discrete in the labeling malignant tumor sections, a different feature of expression from previously reports in human breast cancer. Immunohistochemical analysis with polyclonal antibody Cyr61 demonstrated the constitutive expression of the protein and contributed to neoplastic research alternative for tumors in bitches.

Acute toxicity of Brosimum gaudichaudii Trécul. root extract in mice: determination of both approximate and median lethal doses / Toxicidade aguda de extrato de raízes de Brosimum gaudichaudii Trécul. em camundongos: determinação da dose letal aproximada e da dose letal mediana

The Brosimum gaudichaudii Trécul. (BG) Moraceae, with a high frequency inregions of the Brazilian cerrado (shrubland) and popularly known as “mamacadela”, holds photosensitizing furocoumarins. The BG’s main therapeutic use is the treatment of vitiligo, a skin depigmentation disease that takes hold of approximately 1-2 % of the world population. There is one product on the marketplace (Viticromin®), for which there is no scientifi c research availableabout its experimental toxicity, in spite of its proven clinical effi cacy. Therefore, the development of acute pre-clinical toxicity trials has been proposed (approximate lethal dose, ALD, and median lethal dose, LD50) of the BG root exsudate in laboratory animals. Male, albino mice weighing between 25 and 30 g, in good sanitation conditions have been used. The mice received water and food ad libitum. The BG powder was mixed in 0.9% saline solution and 0.5% cremophor and was administered po and ip. The LD50 was obtained through the Lichtfi eld and Wilcoxon (1949) method. A public domain software was used for the calculations. Ten mice/dose were used - 6 groups for each administration via, including the control group - and the number of deaths within up to 14 days was considered; the control group received an emulsion made up by 0.9 saline solution and 0.5% cremophor. Before establishing the LD50 and aiming at reducing the number of animals used, the DLA was determined when 1 animal per dose was used (the next dose always 50% higher than the previous dose), until identifying the dose that led to the death of 1 animal. Thus, the DLA po was 3750 mg/kg and the DLA ip, 2920 mg/kg. The LD50 po was 3517.54 mg/ kg and the LD50 ip was 2871.76 mg/kg. The product was considered as of being of low toxicity, taking into account only the single dose acute toxicity.

O Brosimum gaudichaudii Trécul. (BG) família Moraceae, é largamente distribuído nas regiões de cerrado doBrasil e é popularmente conhecido como “mamacadela” e possui, na sua composição química, furocumarinas fotossensibilizantes. O principal uso terapêutico do BG é no tratamento do vitiligo, uma doença despigmentante da pele com prevalência de aproximadamente 1-2% da populaçãomundial. Há um produto no mercado (Viticromin®), que é comercializado com tal fi nalidade, havendo poucos dados disponíveis acerca da toxicidade experimental, ao lado de eficácia clínicacomprovada. Portanto, o desenvolvimento de estudos de toxicidade pré-clínica foi proposto (dose letal aproximada, DLA e dose letal mediana, DL50) para o exsudato da raiz de BG em animais de laboratório. Foram utilizados camundongos machos, albinos, pesando entre 25 e 30 g, em boas condições sanitárias, recebendo água e ração ad libitum. O pó de BG foi suspenso em solução salina 0,9% com 0,5% de cremofor e administrado p.o. (gavage) e intraperitonealmente. A DL50 foi obtida através do método de regressão linear de Lichtfi eld & Wilcoxon (1949), utilizando um software de domínio público. Foram formados 6 grupos de 10 animais para cada via de administração, incluindo grupo controle, e o número de mortes foi observado durante 14 dias; o grupo controle recebeu uma emulsão de solução salina 0,9% com 0,5% de cremofor. Antes de estabelecer a DL50 e visando reduzir o número de animais utilizados, determinou-se a DLA,utilizando 1 animal por dose (a próxima dose 50% maior do que a dose anterior), até identifi car a dose letal para 1 animal. Assim, a DLA p.o. foi de 3750 mg/kg e a DLA i.p., 2920 mg/kg. A DL50 p.o. foi de 3517,54 mg/kg e a DL50 i.p. foi 2871,76 mg/kg. O produto foi considerado possuir baixa toxicidade, considerando apenas uma dose neste ensaio de toxicidade aguda.

Reconstrução uretral com retalho autógeno de mucosa bucal após uretrostomia, em cães / Urethral reconstruction with autogenous buccal mucosa graft following urethrostomy in dogs

OBJETIVO: Verificar se fragmentos de mucosa bucal autógena poderiam ser adequados para reconstrução uretral na presença de tecido fibroso, e se tal procedimento poderia determinar a formação de fístulas e ou saculações nos sítios implantares. MÉTODOS: Sete cães adultos foram submetidos à uretrostomia pré-escrotal. Após 40 dias, a uretrostomia foi corrigida por meio da implantação de fragmentos de mucosa bucal na parede ventral da uretra. Os animais foram observados durante 40 dias, quando então, foram submetidos a exames radiográficos e sacrificados para estudo histológico. RESULTADOS: Todos os animais apresentaram cistite e fístulas uretro-cutâneas de duração média de vinte dias foram observadas em seis deles. O aspecto radiográfico aos 40 dias após a reconstrução uretral mostrou: continuidade luminal em sete animais e presença de saculações na parede ventral da uretra em seis, sem interferência na qualidade do jato urinário. As características histológicas indicam integração completa da mucosa bucal ao sítio receptor. CONCLUSÃO: O implante em retalho ventral, com fragmentos de mucosa bucal autógena é adequado para correção de defeito uretral produzido por uretrostomia no cão embora possa ocorrer a formação de saculações no sítio do selamento.

Caracterização anatomopatolóica da papilomatose cutânea em bovinos leiteiros / Anatomopathologic caracterizacion of cutaneous papilomatosis in dairy Cattle

Foram realizadas seis colheitas de papilomas cutâneos por animal, em 40 bovinos, em diferentes momentos, perfazendo um total de 240 amostras, para o estudo histopatológico dos mesmos. Esses bovinos estavam sendo submetidos a diferentes tratamentos para papimatose cutânea. Os papilomas pedunculados foram caracterizados por hiperceratose intensa, hiperplasia da epiderme, hiperplasia de fibroblastos, sendo as fibras colágenas mais abundantes e densas que as dos papilomas planos. Estes mostraram hiperceratose mais leve que os papilomas pedunculados, sendo a fibroplasia dérmica mínima ou ausente. Em ambos os tipos de papilomas durante a fase de regressão foi observada discreta hiperplasia da epiderme e reduzida hiperceratose